В конце 60-х — начале 70-х гг. в большинстве работ, посвященных функ-ционированию макрофагов, использовалась модель иммуногенности макрофагов in vivo. Макрофаги инкубировали с радиоактивно меченным антигеном (например, с 1311-гемоцианином) и через разное время после инкубации вводили син-генным реципиентам, исследуя их способность индуцировать синтез антител [44, 45]. Часть макрофагов инкубировали in vitro, и через разное время определяли количество 1311-меченого антигена, остающегося в клетках или выделяемого в среду. Антигены вначале связывались с клеточной поверхностью, а затем поглощались в составе мембранных пузырьков и быстро подвергались катаболизму. Около 80% антигена, первоначально связавшегося с клеткой, деградировало; большая часть катаболизированного антигена позднее обнаруживалась в культуральной среде в виде 1311-аминокислот (табл. 5.6). В то же время оставшиеся 20% связанного клетками антигена избегали первоначальной дегра-дации и оставались ассоциированными с клетками.

Связанный с клетками пул можно было разделить на три фракции (табл. 5.7) От 3 до 7% исходно связавшегося с клетками белка выделялись макрофагами в среду. Появление этих продуктов не было связано с отщеплением гемоциани-на, ассоциированного с клеточной поверхностью, поскольку их образование не подавлялось обработкой поверхности макрофагов трипсином. В то же время эти продукты были гетерогенны по размеру, что указывает на вызванные макрофагами изменения в строении молекулы. Большая часть выделяемого материала сохраняла способность реагировать с антителами. Секреция антигена происходила преимущественно в первые два часа после его поглощения. Из макрофагов также медленно выделялось небольшое количество антигена, столь же иммуно-генного, как и нативная молекула. Возможно, эта часть секретируемого антигена возникала из внутриклеточного пула в результате экзоцитоза фагосом, возвращавшихся к клеточной поверхности. Второй пул антигена находился внутри клеток и медленно распадался. Между количеством распавшегося антигена и его иммуногенностью не было обнаружено корреляции. В случае с гемо-цианином иммуногенность связанного с макрофагами антигена была относитель-но стабильной в течение нескольких дней, в то время как большая часть анти-гена катаболизировалась. Третья часть связанного с клетками антигена рас-полагалась на клеточной поверхности и представляла собой небольшое число молекул, оставшихся связанными с мембраной после поглощения большей части антигена. Примерно 1 % исходно связанного с клетками белка сохранялся на поверхности клеток, но затем постепенно терялся. Хотя роль этих поверхностно-связанных компонентов не известна, показано, что инкубация макрофагов с антителами к антигену или с трипсином перед введением клеток животному заметно снижала их иммуногенность (табл. 5.8), Этот результат позволилУнэнью и Цероттини [47] постулировать, что иммуногенная детерминанта вовсе не является процессированным фрагментом и что мембрана макрофагов служит тем местом, где некоторые молекулы антигена избегают деградации и сохраняют свою исходную структуру.