Хотя описанные механизмы, обеспечивающие избирательность локализации лимфоцитов, действуют независимо от антигена, введение антигена может оказывать существенное влияние на перемещение этих клеток. Одно из наиболееранних проявлений воздействия антигена, наблюдаемое в первые часы после стимуляции, сводится к увеличению кровотока через стимулированную ткань [54, 55]. Ток крови в месте локального воспаления в коже или в стимулирован-ном лимфатическом узле может возрасти в 10—25 раз по сравнению с нормаль-ным уровнем — в результате сильно увеличивается и количество лимфоцитов, движущихся через воспаленную область. Некоторые антигены еще больше увеличивают накопление лимфоцитов, вызывая временную задержку их выхода из стимулированных лимфатических узлов (см. обзор [55]). В течение 5—7 дней после антигенной стимуляции размер лимфатического узла может увеличиться в 15 раз, что, вероятно, в значительной степени обусловлено измененным движе-нием лимфоцитов. Не исключено, что такое неспецифическое воздействие на скорость поступления и выхода лимфоцитов из стимулированных участков может приводить к усилению иммунного ответа просто в результате увеличения числа лимфоцитов, способных реагировать с антигеном.
Помимо описанных изменений, касающихся всего пула циркулирующих лимфоцитов, антигенная стимуляция оказывает сильное влияние на локальное содержание антиген-специфических лимфоцитов. Это влияние выражается, по-видимому, не в обеспечении избирательного поступления антиген-специфиче-ских лимфоцитов из крови, хотя такая точка зрения и обсуждается в литературе [56], а 1) в удержании уже в лимфоидных тканях случайно попавших туда рецир-кулирующих лимфоцитов, встретивших специфический антиген, и 2) в стимуляции локальной пролиферации и клональной экспансии этих антиген-специфических популяций лимфоцитов. Было показано, что в некоторых случаях активация лимфоцитов с помощью специфического антигена приводит к переходу этих клеток в «неподвижную» фазу пролиферации и дифференцировки, находясь в которой активированные лимфоциты в большинстве своем не способны локализоваться в лимфоидных органах, будучи внутривенно введены в организм, и не могут взаимодействовать с ВЭВ. Подавление функционирования рецепторов для ВЭВ само по себе могло бы обеспечить задержание антиген-специфических лимфоцитов, или, что, возможно, более вероятно, наблюдаемая супрессия просто происходит одновременно с появлением других фенотипических и поверхностных свойств, индуцируемых антигеном и отвечающих за предотвращение перемещения лимфоцитов из того места, где находится антиген,

Примером клеток, проходящих в процессе своей дифференцировки «непод-вижную» стадию, служат клетки В-ряда, локализованные в зародышевых цент-рах [57]. Что касается Т-лимфоцитов, то вскоре после внутривенного введения антигена в селезенке реципиента наблюдается накопление антиген-специфиче-ских Т-хелперов, которые возвращаются в рециркулирующий пул уже в каче-стве делящихся эффекторных клеток только через 2—3 дня [58—60]. Другой пример — это Т-клеточные клоны, чувствительные к антигенам и факторам роста; хотя и выращенные in vitro, эти клетки сохраняют многие признаки нормальных Т-бластов, и тот факт, что все изученные клоны имеют «неподвиж-ный» фенотип [61], убедительно свидетельствует в пользу предположения о наличии определенных Т-бластов с таким же фенотипом и in vivo. Неспособ-ность к нормальной миграции, вероятно, ограничивает возможности использования Т-клеточных клонов для исследований in vivo.
Потеря лимфоцитами способности к перемещению наблюдается также при их активации in vitro. В смешанной культуре большинство лимфоцитов, отве-чающих на митоген или аллогенные лимфоциты, теряет способность узнавать ВЭВ и связываться с ними в течение 3 дней — почти в те же сроки, в которые удается идентифицировать отвечающие клетки как отдельную популяцию крупных лимфоцитов [62]. Неотвечающие малые лимфоциты той же самой куль-

туры продолжают узнавать ВЭВ, подтверждая то, что потеря способности к миграции специфична для активированной популяции.
При локализации процессов пролиферации и дифференцировки активиро-ванных лимфоцитов in vivo вновь образующиеся клетки могут подвергаться либо репрограммированию, либо отбору, приводящему к изменению возможных путей их перемещения. Многие активированные клетки, покидающие то место, где они были стимулированы антигеном, по-видимому, вновь приобретают способность к миграции, однако теперь они проявляют специфичность, зависимую от места и независимую от типа популяции; иными словами, и В-, и Т-бласты специфически возвращаются в области (либо слизистые, либо неслизистые), сходные с теми, в которых они впервые встретились с антигеном (см. обзор 150]). Аналогично этому различные популяции образовавшихся в лимфатических узлах малых Т-лимфоцитов, развивающиеся у молодых овец с возрастом (и в результате антигенной стимуляции?), специфически рециркулируют либо через кишечник, либо через периферические лимфатические узлы [63—65]. В миграции этих популяций отмечается определенная степень органной специфичности, близкая к той, какой обладают клетки лимфом, связывающиеся с ВЭВ in vitro. Таким образом, индуцированная экспрессия поверхностных рецепторов для органоспецифических эндотелиальных детерминант играет, вероятно, суще-ственную роль в распределении по тканям популяций постмитотических эффек-торных лимфоцитов и клеток памяти и, несомненно, имеет большое значение для разделения субпопуляций лимфоцитов, отвечающих за различия в иммунных свойствах слизистых и неслизистых органов. Например, предшественники IgA-секретирующих плазматических клеток, пролиферирующие в микроокружении пейеровых бляшек, могут быть индуцированы или отобраны таким образом, что в дальнейшем они будут экспрессировать рецепторы, специфические в отношении детерминант эндотелиальных клеток, выстилающих капилляры в lamina propria слизистых, что приводит в конечном итоге к избирательному распределению IgA-секретирующих плазматических клеток в слизистых поверхностях. Остается непонятным, являются ли молекулы лимфоцитов и эндотелиальных клеток, обеспечивающие такую избирательную локализацию в lamina propria или в других нелимфоидных областях, идентичными, связанными или они совершенно независимы от рецепторных систем лимфоцит—ВЭВ.

Хотя, согласно имеющимся данным, локальному микроокружению при-надлежит важная роль в установлении миграционной специфичности пост-митотических лимфоцитов, мало что известно о механизмах, отвечающих за избирательную экспрессию соответствующих детерминант на поверхности эндо-телиальных клеток. В связи с этим представляет интерес следующий факт: бры-жеечный узел, дренирующий кишечник, содержит ВЭВ, связывающие как клетки периферического лимфоузла, так и клетки лимфомы, специфичные к ВЭВ пейеровых бляшек [52], —т. е. в данном случае, очевидно, одновременно экспрес-сируются как слизистые, так и неслизистые эндотелиальные детерминанты. Из этого можно сделать вывод, что экспрессия эндотелиальных детерминант, характерных для ВЭВ пейеровых бляшек, может быть вызвана некими растворимыми или клеточными факторами слизистого происхождения, попадающими в лимфатические сосуды слизистых органов. Значение компонентов лимфы для поддержания нормального дифференцированного состояния ВЭВ исследовали Хендрик и др. [66], обнаружившие, что повреждение приносящих (афферентных) лимфатических сосудов периферических узлов у крыс приводит к тому, что ВЭВ утрачивают свои типичные морфологические свойства и способность передавать лимфоциты, поступающие с кровью.

Недавно был идентифицирован поверхностный белок лимфоцитов, по-види-; ж>му принимающий участие в распознавании ВЭВ периферических узлов [67]. Этот белок выявляется с помощью крысиных моноклональных антител MEL-14, которые распознают антигенную детерминанту на всех исследованных клетках лимфомы, связывающихся с ВЭВ периферических узлов, и на нормальных лимфоцитах, но не реагируют ни со специфичными к пейеровым бляшкам, ни с ВЭВ-| несвязывающимися клетками В- и Т-лимфом. Предварительная инкубация клеток лимфом, специфических в отношении ВЭВ периферических узлов, с на-сыщающим количеством MEL-14 приводит к потере этими клетками способности связываться с ВЭВ, тогда как антитела к другим широко представленным поверхностным антигенам не оказывают подобного действия. MEL-14 не инги-бируют связывания специфичных к пейеровым бляшкам опухолевых клеток. Обработка нормальных лимфоцитов антителами полностью угнетает их способ-ность связываться с ВЭВ периферических узлов, хотя при этом их сродство к ВЭВ пейеровых бляшек практически не изменяется (даже несмотря на то, что антитела связываются с огромным большинством нормальных малых лимфо-цитов, в том числе и с клетками, заселяющими пейеровы бляшки). Хотя оконча-тельный вывод нуждается в строгом доказательстве, такая специфичность ингибирования, наблюдаемая в экспериментах с клетками, способными узнавать ВЭВ как периферических узлов, так и пейеровых бляшек, уже может служить

достаточным основанием для того, чтобы считать распознаваемый антиген частью рецептора для ВЭВ периферических узлов, а не какой-то связанной с ним, но не относящейся к делу молекулой. Белок, предположительно узнающий ВЭВ, представляет собой гликопротеин, который при электрофорезе в ПААГ с ДСН мигрирует так же, как полипептид с мол.массой около 80 000 Да. Результаты экспериментов по количественному определению экспрессии антигенной детерминанты нормальных лимфоцитов, распознаваемой MEL-14, суммированы в табл. 6.2. Установленная с помощью иммуногистологических методов локализация клеток, несущих предполагаемый рецептор, в стимулиро-

ванном антигеном лимфатическом узле показана выше (см. рис. б.б). Согласно модели, изображенной на рис. 6.5, предполагаемый рецептор имеется на поверхности огромного большинства малых периферических В- и Т-лимфоцитов, но не у клеток, выстилающих ВЭВ. Антиген, ассоциированный с рецептором, не обнаруживается на клетках зародышевых центров (рис. 6.6) и на культивируемых in vitro Т-клеточных клонах. Удивительно, что тимоциты и значительная часть пре-В-клеток костного мозга несут этот антиген, хотя и в существенно меньшем количестве, чем периферические лимфоциты. Таким образом, экспрессия антигена, реагирующего с MEL-14, строго коррелирует со способностью лимфоцитов узнавать ВЭВ периферических узлов и взаимодействовать с ними. Следовательно, антитела MEL-14 могут служить зондом для выявления одного из специфических дифференцировочных антигенов, непосредственно входящего в состав рецепторов, необходимого для осуществления межклеточного взаимодействия, которое имеет место при функционировании лимфоидной ткани. Следует отметить, однако, что экспрессия этой антигенной детерминанты не ограничивается лимфоидными клетками, — MEL-14 окрашивают также основ-ную популяцию крупных, преимущественно нелимфоидных клеток костного мозга. Пока еще не установлено, принадлежит ли эта антигенная детерминанта поверхностной молекуле, идентичной или лишь перекрестно-реагирующей с предполагаемым рецептором лимфоцита к ВЭВ периферических узлов. Однако
! обнаружение этой детерминанты на поверхности нелимфоидных клеток позво-ляет предположить, что миграция клеток нескольких гемопоэтических рядов (таких, как моноциты, тучные клетки и нейтрофилы) осуществляется с помощью того же самого (или похожего) механизма узнавания эндотелиальных клеток» который действует при миграции лимфоцитов.

Итак, взаимодействие лимфоцитов с ВЭВ занимает одно из центральных мест в цепи процессов, управляющих распределением лимфоцитов по лимфоид-ным органам, и является необходимым для нормального функционирования иммунной системы. Структуры, непосредственно участвующие в этом взаимодействии, экспрессированы на поверхности как лимфоцитов, так и клетокт выстилающих ВЭВ. Различающиеся эндотелиальные детерминанты периферических узлов, с одной стороны, и пейеровых бляшек — с другой, вместе с ком-
j плементарными рецепторами лимфоцитов определяют органную специфичность миграции лимфоцитов либо в слизистые, либо в неслизистые лимфоидные ткани.

; Вероятно, те же самые или похожие по своему действию механизмы контроли-руют движение лимфоцитов по нелимфоидным органам. Эти рецепторные системы играют основную роль в регуляции тканевого распределения функционально различающихся популяций лимфоцитов и, следовательно, в значительной степени определяют особенности локальных иммунных ответов.